ISA插槽是基于ISA總線(Industrial Standard Architecture,工業標准結構總線)的擴展插槽,其顏色一般為黑色,比PCI接口插槽要長些,位于主板的最下端。其工作頻率為8MHz左右,為16位插槽,最大傳輸率16MB/sec,可插接顯卡,聲卡,網卡已及所謂的多功能接口卡等擴展插卡。其缺點是CPU資源占用太高,數據傳輸帶寬太小,是已經被淘汰的插槽接口。目前還能在許多老主板上看到ISA插槽,現在新出品的主板上已經幾乎看不到ISA插槽的身影了,但也有例外,某些品牌的845E主板甚至875P主板上都還帶有ISA插槽,估計是為了滿足某些特殊用戶的需求。